原代細胞傳代技術

一、貼壁細胞的消化法傳代1、吸除或倒掉瓶內舊培養液。2、加入1ml左右消化液（胰蛋白酶或與EDTA混合液）輕輕搖動培養瓶，使瓶底細胞都浸入溶液中。3、消化2-5分鐘后把培養瓶放置在顯微鏡下進行觀察，發現原貼壁的細胞逐漸趨于圓形，在還未漂起時，棄去消化液，加入培養液終止消化。4、用吸管將貼壁的細胞吹打成懸液，分別接種到另外兩到三個培養瓶中，置37℃培養箱中繼續培養。第二天觀察貼壁生長情況。二、懸浮細胞的傳代1、直接傳代①讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3。②用...

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細胞凍存技術介紹

細胞凍存技術實驗室低溫保存設備包括：液氮保存箱、液氮罐、-140℃/-150℃深冷低溫保存箱、-86℃超低溫冰箱、程控降溫儀、低溫冰箱（-20℃、-30℃、-40℃）、藥品保存箱、疫苗保存箱、血庫冰箱、層析柜、防爆冰箱、防火冰箱等。檢驗冰箱可靠性和制冷能力的方法：1、常規冰箱放置溫度計；2、超低溫冰箱放置加熱器、大量樣品或反復開門1.凍存保護劑很多化合物都可以作為凍存保護劑，它們既可以單獨使用也可以聯合使用，例如糖、血清和去污劑。雖然凍存沒有的準則，但是大家普遍認為二甲基亞砜...

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細胞培養中的常見污染類型

凡是混入細胞培養環境中對細胞生存有害的成分和造成細胞不純的異物都可視為污染。細胞污染可分為三大類：微生物污染、細胞間交互污染和化學污染。微生物污染：包括真菌、細菌、支原體和病毒污染。細胞間交互污染：指的是非同種的其他細胞污染化學污染：指影響細胞生存的非細胞所需的化學成分。一、微生物污染細菌和真菌污染是較容易發現的，而病毒、支原體和其他細胞系的污染是不容易被察覺的。1.細菌污染時培養液pH值改變，溶液變渾濁。細菌的大量增殖導致細胞液中營養大量消耗，并產生毒素抑制細胞的生長，終導...

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細胞培養相關知識

1.液體培養基的保存是冷藏好？還是冷凍好？要冷藏！因為液體培養基經冷凍后再經溶化時，其溶液的PH值會發生改變，溶液往往變堿，某些成分溶解也會受到影響對細胞生長不利。故液體培養基一定要存放在冷藏箱中，通常液體培養基在冷藏條件下可存放6個月~一年。2.液體培養基中谷氨酰胺的作用，及使用方法。幾乎所有的細胞對谷氨酰胺有較高的要求，細胞需要谷氨酰胺合成蛋白質，在缺少谷氨酰胺時，細胞生長不良而死亡。所以，各種培養液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩定，應置-20?C冰凍保...

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STR細胞鑒定意義

導讀：新買到的細胞，實驗室傳了幾代的細胞，又或者儲存于超低溫冰箱幾年不用的細胞，被污染了么？鑒定正確么？用它做研究會影響實驗結果么？沒有經過相應的細胞鑒定，使用了被污染的細胞，經過大量的實驗，寫出一篇論文，但是結論被推翻，論文被召回，大量的時間、物力和人力被浪費，一切都要從頭再來。背景介紹應用于生物醫學研究領域的哺乳動物細胞被錯誤鑒定和交叉污染的問題，一直是一個普遍存在的突出問題。據統計，國外實驗室有20%左右的細胞株被錯誤鑒定和交叉污染，NIH和ATCC近兩年都對此發出呼吁...

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