實用哺乳動物細胞培養手冊（下）

細胞培養所用玻璃及塑料制品的清洗與消毒清洗在組織細胞培養中，體外細胞對任何有害物質都非常敏感。微生物產品附帶雜物，上次細胞殘留物及非營養成分的化學物質，均能影響培養細胞的生長。因此對新使用玻璃器皿和重新使用的培養器皿都要嚴格*的清洗，且要根據器皿的組成材料不同，選擇不同的清洗方法。玻璃器皿的清洗組織細胞培養中，使用量大的是玻璃器皿，故工作大的是玻璃器皿的清洗。一般玻璃器皿的清洗包括浸泡、刷洗、浸酸和沖洗四個步驟。清洗后的玻璃器皿不僅要求干凈透明無油跡，而且不能殘留任何物質。（...

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實用哺乳動物細胞培養手冊（中）

細胞培養環境1、實驗室設計細胞培養是一種無菌操作技術，要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養室的設計原則一般是無菌操作區設在室內較少走動的內側，常規操作和封閉培養于一室，而洗刷消毒在另一室。2、常用設施及設備（1）超凈工作臺：也稱凈化工作臺，分為側流式、直流式和外流式三大類。（2）無菌操作間：一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作...

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實用哺乳動物細胞培養手冊（上）

細胞培養基本概念細胞培養是指從體內組織取出細胞在體外模擬體內環境下，使其生長繁殖，并維持其結構和功能的一種培養技術。細胞培養的培養物可以是單個細胞，也可以是細胞群。細胞培養目的與用途1、科學研究：藥物研究開發與基礎研究藥物研究與開發(1)新藥篩選：如化學合成藥物藥效研究、中藥有效成分篩選與鑒定等。(2)疫苗研究與開發：如病毒性疫苗的研究與開發（肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等）、腫瘤疫苗(多肽疫苗)等。(3)基因工程藥物研究與開發：如干擾素研究與開發，細胞生長因子研究與開發等。(4...

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原代細胞培養中常遇到的誤區

原代細胞培養中常遇到的誤區原代細胞（primaryculturecell）是指從機體取出后立即培養的細胞。有人把培養的第1代細胞與傳10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。原代細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫學基礎研究，如蛋白質組學、基因組學、細胞株（系）研究、DNA，RNA和遺傳學研究等，還可應用于當今熱門的生物醫藥產業如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。原代細胞在生物醫藥領域有不可替代性作用，市場前景廣闊。原代細胞的培養是指直接從機體取下細胞、組織和器...

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原代細胞鑒定技術

一、形態學鑒定1.在倒置顯微鏡中直接觀察活細胞的形態學特征2.細胞染色檢查：a)將無菌玻片置于細胞培養皿中，加細胞懸液后培養；b)待細胞長滿玻片后取出，用PBS清洗，之后放于載玻片上，待其自然干燥；c)用PBS/甲醇（1:1）固定15分鐘；d)棄固定液，加合適的染色液染色；e)染色完畢后用清水洗凈，置于空氣中干燥，f)干燥后，用二甲苯透明，光學樹脂封片后觀察。二、免疫組織細胞化學鑒定1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片；2.PBS清洗標本3...

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