技術文章
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技術文章
2020-65
在培養細胞的過程中,你是否遇到:本應貼壁的細胞,某次傳代后出現不貼壁了?細胞養不起來,生長速度緩慢,或突然停滯生長?細胞狀態不好,視野中總是存在較多死細胞?想要知道如何才能把細胞養好,我們需要先明確培養細胞的3個關鍵要素:良好的細胞來源,嚴謹的實驗操作,正確的培養體系。關于操作,其中存在許多人為不可控因素,我們后期會另辟專題討論,今天重點聊下如何正確選擇合適的培養體系。細胞的培養體系一般指用于培養細胞的*培養基,它在培養細胞過程中主要發揮4大功能:提供營養物質、維持細胞穩態、...
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2020-62
Hyclone胎牛血清使用方法:在細胞培養過程中,經常加入5%-20%的Hyclone胎牛血清澳洲,常使用的Hyclone澳洲胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細胞的基因表達譜,影響后續實驗的結果,我們在實驗中使用10%的Hyclone澳洲胎牛血清培養293T細胞,效果非常好。但是有些細胞也會使用5%的HycloneFBS或者20%的Hyclone胎牛血清,要根據具體細胞選擇合適的胎牛血清濃度。HyClone胎牛血清保存方法:(1)長期保存的血清必須儲存于-20℃-7...
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2020-525
2020-519
人源細胞系作為體外模型而被廣泛應用于生物醫學研究。正確數據的獲得常依賴于細胞系的特性,尤其是當它用來替代其來源者的組織時。人源細胞系常規培養傳代流程:(1)吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在1-2min)(2)注意培養基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存(3)取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的*培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中...
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2020-59
特級胎牛血清清需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。血清在動物細胞培養中起著多方面的作用可以概括為:①提供細胞生存和增殖所必需的生長調節因子。②補充基礎培養基中沒有或量不足的營養成分。③含有一些可供貼壁細胞型細胞貼壁生長的基質成分。④提供載體蛋白,可結合維生素、脂質、金屬離子等。⑤在一些情況下,中和毒性物質保護細胞...
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