人源細胞系常規培養傳代流程

　　人源細胞系常規培養傳代流程：

　　（1）吸出原培養瓶中的培養基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞（注意把握消化時間，通常控制在1-2min）

　　（2）注意培養基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存

　　（3）取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中，添加適當的*培養基，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養

　　（4）鏡下觀察消化情況，在HS505.T人淋巴結成纖維樣細胞生長特性邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂浮）去掉胰酶，加6-8ml*培養基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。

　　人源細胞系的培養注意事項：

　　1．傳代培養時要注意無菌操作并防止細胞之間的交叉污染，所有操作要盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作。每一種細胞使用一套器材，培養用液應嚴格分開。

　　2．每天觀察細胞形態，掌握好細胞是否健康的標準：健康細胞的形態飽滿，折光性好，生長致密時即可傳代。

　　3．如發現細胞有污染跡象，應立即采取措施，一般應棄置污染的細胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BSS或培養基反復清洗，隨后培養基中加入較大量的抗菌素，并經常更換培養基等。

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