原代細胞分離與培養方法介紹

凡是來源于胚胎、組織器官及外周血，經特殊分離方法制備而來的原初培養的細胞稱之為原代細胞。原代細胞的培養也叫初代培養是從供體取得組織細胞在體外進行的培養，是建立細胞系的DI一步，是一項基本技術。原代細胞接近和能反映體內生長特性，適宜用于藥物敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。方法1.組織塊培養法組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶（或皿）中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。2.消...

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使用血清應該注意的事項

關于血清使用的幾點建議1、血清必須貯存-20℃，如存放于4℃，請勿超過兩周，對于某些單位一次無法用完一瓶，可在無菌條件下將其40-45ml分裝于無菌50ml離心管中（或血清瓶中），由于血清解凍時體積會增加10％，必須預留此膨脹體積的空間，否則易發生污染或容器凍裂的情形。2、一般公司所提供的血清一般為200ml和500ml裝量，因此建議在使用中宜采取逐步解凍的方法解凍血清：-20℃→4℃冰箱或冷庫溶解24小時→室溫下全溶后再分裝，一般以50ml無菌離心管中分裝40-45ml。使...

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增加你的科研文章影響力的8招

增加你的科研文章影響力的八招看到中國的論文數已經，但引用量仍舊不盡人意。怎樣提高文章的引用量越來越引起人們的重視，因為引用量從一個角度反映出文章影響科學同行的程度，雖然正負影響都有可能。我不是大牛，自己文章的引用率也不算高。這里我談談自己淺薄的想法和體會，希望能拋磚引玉，共同促進我國科學的發展和影響力。1.酒香不怕巷深，好文不怕沒人看。很明顯，重要的是文章的質量。很多諾貝爾獎級的文章并不是發表在《Nature》或《Science》上的。好文章發表在二流雜志上剛開始沒人注意，但...

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細胞培養新手應該注意的地方

培養細胞是醫學研究生的基本功。細胞嬌貴，一不小心容易出問題。作為新手培養細胞要注意那些呢。1、不要燒瓶口。大多數人都喜歡在酒精燈的火焰上關瓶子，覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養基怎么越用越發紫的困惑？知道為什么嗎？燒瓶口燒的。培養基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候，熾熱的空氣進入瓶內。塞緊塞子放入冰箱后，空氣變冷，壓力驟降，培養基中的碳酸就會轉化成二氧化碳，釋放出來。培養基中的碳酸少了，當然會變堿。如果不燒瓶口的話，你會發現培養液變堿的速度會...

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細胞培養和轉染

細胞培養和轉染1.細胞培養(HEK293T)1)顯微鏡下觀察細胞，細胞生長狀態良好，去上清；2)加入預熱的PBS3ml,溫柔地清洗細胞,棄去PBS；3)用胰蛋白酶消化細胞，通常75cm2培養瓶的貼壁細胞用3ml胰蛋白酶于37oC處理5min；4)待細胞脫落后，加入5mlDMEM培養液(含10%FBS)以終止消化反應，并將細胞懸液轉移入15ml或50ml離心管中；5)1000rpm離心5min，去除上清；6)加入10mlDMEM培養液(含10%FBS)，重新懸浮細胞，使細胞充分...

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