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更新時間:2026-04-14
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賽默飛Qubit4.0蛋白質定量檢測儀
在蛋白質組學、細胞生物學及生物制藥研發中,總蛋白濃度的準確定量是Westernblot、質譜分析及酶活性測定等下游實驗的關鍵前提。傳統比色法(如Bradford和BCA)雖應用廣泛,卻容易受去垢劑、還原試劑及緩沖液組分的干擾,導致結果偏差。Qubit4.0蛋白質定量檢測儀作為Invitrogen™第四代臺式熒光計,采用熒光染料特異性結合技術,可在復雜緩沖液環境中實現對蛋白質的高選擇性定量。其12.5μg/mL的檢測下限與寬達5個數量級的動態范圍,使其在處理珍貴微量樣本和復雜裂解液時尤為可靠。
選擇Qubit4.0蛋白質定量檢測儀,意味著為您的蛋白質分析工作選擇了一份高特異性、快速準確的熒光定量方案。
一、產品核心優勢解析
Qubit4.0蛋白質定量檢測儀的設計聚焦于蛋白質定量中的兩大核心挑戰:如何在復雜緩沖液環境中獲得準確濃度,以及如何用微量珍貴樣本完成檢測。
高特異性熒光檢測原理
該儀器采用專門研制的熒光染料,這些染料只有在與蛋白質結合時方可發射熒光信號。與傳統紫外分光光度法測量280nm所有吸光物質不同,Qubit4.0蛋白質定量檢測儀通過特異性熒光染料區分目標蛋白與雜質,即使有還原試劑、鹽、游離核苷酸、氨基酸或DNA等常見污染物共存,仍能提供準確結果。
與BCA和Bradford等傳統比色法相比,熒光法具有更寬的動態范圍和更高的準確度,熒光蛋白檢測試劑盒對蛋白質具有高選擇性,并且在存在還原試劑的情況下也能保持高精度。
微量樣本兼容性與檢測靈敏度
Qubit4.0蛋白質定量檢測儀僅需1μL樣品即可完成檢測,對于濃度低至12.5μg/mL的蛋白質樣本仍能進行準確定量。這一特性使其特別適合處理從稀有樣本中提取的蛋白質、細胞裂解液中的低豐度靶標以及純化后的微量蛋白樣品。
儀器搭載雙核處理器,檢測速度約每個樣本3秒,預熱時間少于35秒,顯著提升了樣品質控環節的工作效率。
寬動態范圍,覆蓋多樣化濃度需求
Qubit4.0蛋白質定量檢測儀提供兩種互補的檢測試劑盒,覆蓋12.5μg/mL至20mg/mL的完整濃度范圍。Qubit蛋白檢測試劑盒可精準定量12.5μg/mL至5mg/mL范圍內的樣品;Qubit蛋白寬范圍(BR)檢測試劑盒則將定量范圍擴展至0.1mg/mL至20mg/mL,使大多數樣品能夠以純品(未稀釋)形式直接檢測,免除了傳統蛋白定量測定方法所需的推算和稀釋步驟。
兩種檢測試劑盒的選擇指南
Qubit4.0蛋白質定量檢測儀配套兩種獨特的蛋白定量試劑盒,用戶可根據樣品濃度和污染物類型靈活選擇。
對比維度Qubit蛋白檢測試劑盒Qubit蛋白BR檢測試劑盒
貨號Q33211(100次)/Q33212(500次)A50668(100次)/A50669(500次)
定量范圍12.5μg/mL至5mg/mL0.1至20mg/mL
樣品體積1-20μL10或20μL
孵育時間15分鐘(室溫)10分鐘(室溫)
耐受污染物還原試劑(DTT、β-巰基乙醇)、鹽、游離核苷酸、氨基酸、溶劑、DNA去垢劑、還原試劑(DTT、β-巰基乙醇)、鹽、核酸
檢測選擇性對蛋白質高度選擇性對蛋白質高度選擇性
檢測平臺Qubit4、Flex等Qubit系列熒光計僅限Qubit4熒光計
蛋白間差異低蛋白間變異(8.7%,堿性組蛋白除外)低蛋白間變異
Qubit蛋白BR檢測試劑盒的關鍵優勢在于其寬動態范圍和兩點標準曲線設計:用戶只需使用兩點標準品進行校準,無需耗時制備多條標準曲線,即可直接獲得蛋白濃度,免除了離線計算步驟。該檢測可兼容多種常見污染物,包括去垢劑、還原試劑(如DTT、β-巰基乙醇)、鹽和核酸,使其特別適用于細胞裂解液、血清、血漿或復雜蛋白混合物的定量。
快速簡便的操作流程
Qubit4.0蛋白質定量檢測儀的操作極為簡便,大幅減少了蛋白質定量實驗的時間成本。
檢測步驟
開機預熱,預熱時間少于35秒
根據樣品濃度選擇合適的檢測試劑盒(蛋白檢測或蛋白BR檢測)
按說明書比例混合染料與緩沖液,制備工作溶液
將1-20μL樣品加入工作溶液中,混勻
室溫孵育(蛋白檢測約15分鐘,蛋白BR檢測約10分鐘)
將檢測管插入儀器,觸摸屏選擇對應檢測程序
先檢測兩點標準品(S1和S2),儀器自動生成校準曲線
檢測樣品,3秒內顯示濃度結果
數據導出與存儲
Qubit4.0蛋白質定量檢測儀最多可存儲1000個樣品結果,數據可通過USB驅動器、USB連接線或WiFi無線傳輸至ThermoFisherConnect云平臺,便于長期管理和團隊分享。5.7英寸彩色觸摸屏支持包括簡體中文在內的7種語言界面,操作直觀便捷。
二、與傳統蛋白定量方法的性能對比
Qubit4.0蛋白質定量檢測儀與傳統比色法在多個維度上存在顯著差異:
對比維度Qubit4.0熒光法Bradford/BCA比色法
檢測原理熒光染料特異性結合蛋白基于顯色反應的比色測定
污染物影響耐受還原試劑、鹽、核酸、部分去垢劑(BR檢測)易受去垢劑、還原試劑干擾
動態范圍寬,12.5μg/mL至20mg/mL相對較窄
靈敏度低至12.5μg/mL,可檢測低豐度樣本靈敏度有限,低濃度樣本偏差大
檢測速度每個樣本<3秒反應時間長,需溫育
樣品體積1-20μL通常需要更大體積
標準曲線兩點校準,無需每次繪制標準曲線需要多條標準品制備標準曲線
蛋白間變異低(8.7%)較高,不同蛋白間差異大
Qubit4.0蛋白質定量檢測儀相比Bradford等傳統檢測方法提供了更寬的動態范圍和更高的準確度。研究表明,使用Qubit蛋白檢測試劑盒測得的蛋白質間變異可低至8.7%(排除堿性組蛋白后),顯著優于傳統比色法,這一特性對于確保實驗結果的一致性和可比性具有重要意義。
滿足多元化的蛋白質定量需求
Qubit4.0蛋白質定量檢測儀已在多項蛋白質研究應用中驗證了其可靠性能。
細胞裂解液定量
在進行Westernblot分析時,準確的蛋白上樣量是獲得可比性結果的前提。Qubit4.0蛋白質定量檢測儀可精準測定細胞裂解液的總蛋白濃度,確保電泳前各泳道蛋白負荷一致。研究數據表明,使用Qubit蛋白BR檢測測定的裂解物蛋白濃度,在后續Westernblot中展現出更一致的目標信號強度。
純化蛋白與抗體定量
對于重組蛋白純化、抗體生產及酶制劑的濃度測定,Qubit4.0蛋白質定量檢測儀可提供快速、準確的定量結果。其寬動態范圍覆蓋了從低濃度純化產物到高濃度原液的全濃度區間,無需稀釋即可直接檢測。
表達滴度快速估算
在蛋白質表達條件優化和粗提物表達水平篩查中,Qubit4.0蛋白質定量檢測儀可提供快速的總蛋白定量,幫助研究人員快速評估不同構建體或培養條件下的表達水平。
復雜樣品類型兼容
該檢測適用于多種蛋白質樣品類型,包括純化蛋白、細胞裂解液、組織提取物、血清、血漿及復雜蛋白混合物。Qubit蛋白BR檢測試劑盒可兼容去垢劑和還原試劑等常見污染物,使其特別適合處理天然來源的復雜樣品。
與NanoDrop的功能互補關系
Qubit4.0蛋白質定量檢測儀與NanoDrop紫外分光光度計是功能互補而非相互替代的工具,兩者在實驗室定量工作中各有所長。
決策維度推薦選擇核心考量
檢測目的準確定量蛋白濃度→Qubit4.0;快速篩查純度→NanoDropQubit提供特異性定量,NanoDrop提供純度信息
樣品珍貴度微量珍貴樣本→Qubit4.0;樣品充足→兩者皆可Qubit僅需1μL樣品
濃度要求低濃度/低豐度樣本→Qubit4.0;高濃度樣本→兩者皆可Qubit靈敏度優勢在低濃度區尤為突出
污染物情況復雜緩沖液/還原試劑存在→Qubit4.0熒光法耐受性優于比色法
檢測通量少量關鍵樣本精確定量→Qubit4.0;大量樣本初步篩查→NanoDropQubit專注于關鍵步驟的精準定量
建議的工作流程:許多實驗室采用Qubit4.0蛋白質定量檢測儀與NanoDrop配合使用的策略——先用NanoDrop快速評估樣品中是否存在污染物,獲取大致濃度范圍和純度信息(A280、A260/A280比值);再對需要用于關鍵下游實驗的樣本用Qubit進行精確定量。這種組合策略既利用了紫外分光法快速檢測雜質的能力,又發揮了熒光法的特異性和靈敏度優勢。
三、主要技術參數一覽
Qubit4.0蛋白質定量檢測儀的主要技術參數如下:
參數類別具體規格
檢測原理熒光染料特異性結合定量
檢測靶標蛋白質(另支持DNA、RNA)
動態范圍5個數量級
樣品體積1-20μL
檢測時間<3秒/樣本
預熱時間<35秒
檢測限(蛋白)12.5μg/mL
光源藍色LED(峰值~470nm),紅色LED(峰值~635nm)
檢測器光電二極管(測量范圍300-1000nm)
數據存儲最多1000個樣品結果
顯示屏5.7英寸彩色觸摸屏
數據導出USB驅動器、USB數據線、WiFi
支持語言英語、簡體中文等7種語言
外形尺寸13.6×25×5.5cm
重量743g
工作溫度10-40°C
工作濕度20-80%(無冷凝)
電源100-240VAC,50/60Hz
四、選型參考與采購建議
在選擇Qubit4.0蛋白質定量檢測儀時,可參考以下因素:
樣品類型:純化蛋白、抗體、細胞裂解液、血清/血漿、組織提取物等
濃度范圍:常規濃度(12.5μg/mL-5mg/mL)選蛋白檢測試劑盒Q33211/Q33212;高濃度或需免稀釋檢測選蛋白BR檢測試劑盒A50668/A50669
污染物情況:含還原試劑選蛋白檢測試劑盒;含去垢劑或復雜緩沖液選蛋白BR檢測試劑盒
使用頻率:常規用量選擇100次檢測規格;高通量實驗室選擇500次檢測規格
預算參考:Qubit4.0熒光定量儀主機市場參考價在2.0萬-4.2萬元之間,蛋白檢測試劑盒Q33211(100次)約1,468-1,561元,Q33212(500次)約4,436元,具體價格根據配置和采購渠道有所差異
總結
綜上所述,賽默飛Qubit4.0蛋白質定量檢測儀憑借其高特異性熒光檢測原理、微量樣本兼容性以及兩種互補的試劑盒配置,成為蛋白質定量的可靠選擇。無論是Westernblot前的裂解液定量、純化蛋白的濃度測定,還是復雜生物樣品的總蛋白分析,這款設備都能提供快速、準確且高重復性的檢測支持。根據您的樣品類型和濃度范圍選擇合適的試劑盒,并遵循規范的操作流程,將有助于提升蛋白質分析工作的效率與數據可靠性。