?26616蛋白marker是什么東西

26616蛋白marker是什么東西

    在蛋白質免疫印跡和凝膠電泳實驗中，你可能會在凝膠或轉印膜上看到一排清晰的彩色條帶，它們如同實驗進程中的“路標"。其中，貨號為26616的預染蛋白marker，就是這樣一款在生命科學研究中應用廣泛、備受信賴的經典工具。

一、產品身份：它是什么？

    26616蛋白marker是ThermoScientific™旗下PageRuler™系列的一款即用型三色預染蛋白分子量標準。

    它是將10種已知分子量的標準蛋白，分別與藍、橙、綠三種顏色的染料共價偶聯后混合而成，分子量覆蓋范圍從10kDa到180kDa。與染料共價偶聯，是預染蛋白marker的核心技術原理。

    產品規格與參考價格

    該產品提供兩種包裝規格：

    26616：2x250μL，適用于約50-100個凝膠泳道（5-10μL/泳道）

    26617：10x250μL，適用于高通量實驗室

    參考價格：ThermoScientific價格為851.00元/盒（26616，2x250μL）

    10條彩色蛋白的具體分子量

    條帶顏色分子量（kDa）

    橙色（參考帶）70

    綠色（參考帶）10

    藍色180、130、100、55、40、35、25、15

    其中70kDa和10kDa分別作為高、低分子量區域的醒目參考條帶，便于在電泳過程中快速定位。

    技術原理

    該產品的技術核心是共價偶聯技術——將染料分子通過化學鍵牢固地“鎖"在標準蛋白上。這種穩定的結合方式，確保了在后續的電泳、轉膜等實驗步驟中，彩色信號都能全程可見、不會脫落。

    儲存緩沖液成分

    儲存緩沖液配方為：62.5mMTris-H?PO?（25°C下pH7.5）、1mMEDTA、2%SDS、10mMDTT、1mMNaN?和33%甘油。其中含有SDS和DTT等成分，使其在低溫下可能出現沉淀，這正是上樣前需要回溫混勻的原因。

二、核心作用：它在實驗中能做什么？

    在WesternBlot實驗流程中，26616蛋白marker扮演著三個所需的角色：

    1.實時監控電泳進程

    為什么需要它：SDS-PAGE電泳時，普通的蛋白樣品是無色的，我們無法了解電泳進行到了哪一步。

    它的作用：26616marker的三色條帶全程可見，可實時判斷：

    蛋白質是否已進入分離膠

    不同分子量的蛋白是否正在分開

    目標蛋白是否進入了最佳分離區域

    如果觀察到Marker條帶異常（如彌散、缺失），可立即中斷電泳，避免浪費樣品。

    2.快速評估轉膜效率

    這是該產品適用功能之一。在WesternBlot轉膜結束后，只需將轉印后的PVDF膜或硝酸纖維素膜取出，放在白色背景上用肉眼觀察：

    如果膜上能看到清晰的彩色條帶→說明轉膜系統工作正常，蛋白已從凝膠成功轉移到膜上

    如果膜上沒有條帶→說明轉膜失敗，需要檢查電極是否接反、膜是否未激活、緩沖液是否失效等

    整個過程僅需10秒左右，無需額外染色步驟，可快速定位問題，有效節省時間與試劑。

    3.大致估算目標蛋白分子量

    通過與Marker彩色條帶的位置進行對比，可以對目標蛋白的分子量進行大致估算。不過，由于染料共價修飾會影響蛋白遷移率，該產品指示的是“表觀分子量"，不適合用于精確定量。如需獲得更精確的分子量數據，建議配合使用非預染蛋白marker進行校準。

三、使用指南：正確的操作方法

    操作步驟

    回溫：從-20℃取出后，室溫（20-25℃）放置5-10分鐘回溫，使其中可能析出的SDS重新溶解。

    混勻：上樣前充分輕柔混勻（可使用手指輕彈管底或上下顛倒），切勿劇烈渦旋。

    上樣：根據凝膠厚度，吸取適量Marker直接加入凝膠孔中：

    小型凝膠（厚度0.75-1.0mm）：5μL/孔

    小型凝膠（厚度1.5mm）：10μL/孔

    大型凝膠：根據厚度適當增加至10-20μL

    電泳：與待測樣品一同進行SDS-PAGE電泳，全程可觀察彩色條帶的遷移情況。

    正確做法

    加熱或煮沸無需加熱，直接室溫上樣即可

    低溫操作使用前室溫回溫5-10分鐘，低溫下SDS易析出導致條帶異常

    冷凍狀態直接開蓋必須回溫至室溫后再開蓋，防止冷凝水進入污染

    使用普通吸頭建議使用無蛋白酶的滅菌吸頭上樣，防止蛋白降解

    未混勻直接上樣解凍后需輕柔混勻，使沉淀充分溶解，否則可能導致條帶彌散

    特別注意：該產品含有SDS，蛋白已變性，不宜作為天然蛋白分子電泳時的分子量參照標準。

四、保存方法

    保存方式有效期適用場景

    -20℃冷凍2年長期保存

    4℃冷藏約3個月短期使用（注意避免反復開蓋）

    分裝保存—建議根據使用頻率分裝，避免反復凍融，每次取一支使用

    特別提示：由于Marker中含有SDS，低溫下易析出，長期冷凍保存后必須回溫至室溫并充分混勻后再使用，否則可能出現條帶異常。

五、常見問題與排查

    Q1：電泳后條帶沒有分離，是什么原因？

    Marker煮沸過：該產品不可加熱，煮沸會破壞蛋白結構→丟棄，換用新管

    上樣量過大：加入較少的體積，或使用前用蛋白上樣緩沖液適當稀釋

    凝膠濃度不匹配：確認凝膠濃度適合該分子量范圍（10-180kDa）

    Q2：轉印到膜上的效果不理想，是什么原因？

    Marker上樣量不足：根據凝膠厚度確保足夠的上樣量（小型凝膠5-10μL）

    大分子蛋白（>100kDa）轉印不全面：需延長轉膜時間或適當提高轉膜電壓

    膜材質不匹配：該Marker與PVDF膜、尼龍膜和硝酸纖維素膜兼容，均能觀察到轉印效果

    Q3：為什么在不同電泳條件下，條帶位置會有偏差？

    由于預染蛋白與染料共價偶聯，在不同緩沖體系中遷移率會有所差別，此為“表觀分子量"，屬于正常現象。建議：

    固定使用同一種電泳緩沖體系（如Tris-甘氨酸）

    如需要更精確的分子量測定，可用非預染蛋白Marker進行校準

    六、為什么它是經典之選？

    PageRuler預染蛋白Marker自2000年初第一代產品上市以來，深受全球科研人員信賴，積累了20多年深厚經驗、2萬篇引用文獻和數百萬忠實用戶。用戶評價中常見的關鍵詞包括：顏色清晰，易于觀測；條帶銳利，分布均勻；上樣量少，高性價比。

總結

    特點說明

    產品線ThermoScientific™PageRuler™預染蛋白分子量標準

    貨號26616/26617

    分子量范圍10-180kDa（10條蛋白）

    顏色設計三色（藍、橙、綠），70kDa橙色參考帶，10kDa綠色參考帶

    主要用途監控SDS-PAGE電泳進程+評估WesternBlot轉膜效率+估算蛋白分子量

    使用前準備室溫回溫5-10分鐘，充分輕柔混勻，無需加熱

    保存條件-20℃長期保存，短期可4℃（約3個月），避免反復凍融

    參考價格851.00元/盒（26616，2×250μL）

    26616蛋白marker通過將染料與標準蛋白共價結合，實現了電泳和轉膜全程的可視化監控，是WesternBlot實驗中一款操作便捷、信息直觀的工具。理解其原理、規范使用并妥善保存，將有效提升實驗效率與結果可靠性。

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