?賽默飛培養箱滅菌程序

更新時間：2026-03-13

點擊次數：203

賽默飛培養箱滅菌程序

在細胞培養工作中，微生物污染是實驗人員面臨的主要挑戰之一。定期對培養箱進行滅菌，是保障細胞健康生長的關鍵措施。賽默飛371、3111等型號培養箱配備了專業的140℃高溫干熱滅菌程序，能有效殺滅包括支原體、霉菌、細菌和難以殺滅的孢子在內的各類微生物。本文將詳細介紹這一程序的操作流程與注意事項。

一、為什么需要專門的滅菌程序？

許多實驗室日常會用70%酒精擦拭培養箱內壁，但這只能進行表面消毒，無法殺滅隱藏在角落、傳感器縫隙和HEPA過濾器深處的頑固微生物。

賽默飛培養箱的140℃高溫干熱滅菌程序通過將腔體加熱至140℃并維持一定時間，實現對整個內腔的滅菌。這一程序的優勢在于：

全面：高溫能滲透到每個角落，殺滅所有微生物

無需拆卸：TC熱導傳感器可留在腔內，無需取出

高效快速：高溫消毒階段不到3小時，總循環不到12小時

二、滅菌前的準備工作

在執行滅菌程序前，必須完成以下準備工作，任何疏漏都可能導致設備損壞或滅菌失敗。

2.1清空培養箱

將所有細胞培養物、培養基、試劑等轉移到其他培養設備中

取出所有可移動部件：不銹鋼擱板、擱板支架、加濕水盤

倒掉水盤中的水并清洗干凈

2.2取出HEPA過濾器

這是最重要的一步：必須取出位于箱內或后部的HEPA高效空氣過濾器。HEPA過濾器無法耐受140℃高溫，留在箱內會損毀。

2.3基礎清潔

用溫和的中性清潔劑或70%乙醇擦拭內腔、門內側以及取出的擱板等部件，去除表面的灰塵和有機物殘留。

三、滅菌程序的啟動與運行

3.1啟動程序

確認箱體清空且HEPA過濾器已取出后，關閉箱門

找到控制面板上的滅菌循環按鈕（Steri-Cycle）

長按按鈕3-5秒，直至指示燈亮起，屏幕顯示滅菌程序啟動提示

3.2程序運行過程

滅菌程序將自動完成升溫、保溫和冷卻三個階段：

升溫階段：箱內溫度逐漸升高至140℃

保溫階段：在140℃維持2-3小時。這是殺滅所有微生物的關鍵時期，能確保殺滅包括芽孢在內的所有污染物

冷卻階段：程序結束后自動進入冷卻，整個過程約需12小時

3.3運行期間注意事項

程序運行期間請勿打開箱門

無需進行任何參數設置，設備會自動監控全過程

確保實驗室電源穩定，避免中途斷電

四、滅菌后的恢復工作

4.1等待冷卻

必須等待內部溫度自然降至安全范圍（通常低于60℃）后，才能打開箱門，以防燙傷或玻璃門因驟冷而破裂。

4.2重新安裝部件

待箱體冷卻后：

重新安裝已清潔的擱板、支架等部件

裝回HEPA過濾器

向加濕水盤加入新鮮的無菌蒸餾水或去離子水至推薦水位

4.3必須進行的校準

滅菌程序結束后，必須執行CO?傳感器歸零校準。這是因為高溫可能影響傳感器的零點。

校準步驟：

將CO?設定值設為0%

開門讓箱內外空氣充分交換數分鐘

關門穩定運行12小時以上

進入校準菜單，執行CO?零點校準

4.4溫度驗證

如有條件，可使用經計量認證的外部溫度記錄儀放入箱內，與培養箱自身顯示溫度進行比對，驗證其準確性。

五、注意事項與安全提示

5.1壓力控制

滅菌過程中及日常使用中，CO?進氣壓力要求分壓<0.07MPa。過大的壓力會充壞過濾膜，導致系統不穩定。

5.2滅菌頻率建議

根據使用情況，建議每3-6個月執行一次完整的高溫滅菌循環。若使用頻繁、培養物種多樣或曾發生污染，應縮短周期。

5.3電磁閥保護

若長時間不使用培養箱，必須把CO?設置為0，否則電磁閥長期處于工作狀態會發熱損壞。

5.4異常情況處理

若有異常情況應立即斷開電源使儀器終止運轉。儀器表面不可與汽油、香蕉水等揮發性化學品接觸。

六、滅菌效果驗證

為確認滅菌程序的效果，可定期進行箱體菌落沉降實驗：

在滅菌后的培養箱內放置瓊脂培養皿

開門暴露一定時間后關閉，培養觀察菌落生長情況

如無微生物生長，說明滅菌效果良好

總結

賽默飛培養箱滅菌程序的140℃高溫干熱滅菌技術，是保障細胞培養環境潔凈的重要工具。掌握規范的滅菌操作流程，核心在于充分準備、嚴格執行、恢復校準：

準備階段：清空箱體、取出HEPA過濾器、清潔內腔

執行階段：啟動程序，等待12小時完成升溫和滅菌

恢復階段：等待冷卻、重新安裝部件、校準CO?傳感器

遵循本文所述的操作要點，您就能有效去掉培養箱內的微生物污染，為細胞提供穩定可靠的生長環境。